Verfahren zur DNA Aufreinigung mit magnetischen Partikeln auf einer zentrifugal-mikrofluidischen Einweg-Foliendisk
Konferenz: MikroSystemTechnik - KONGRESS 2011
10.10.2011 - 12.10.2011 in Darmstadt, Deutschland
Tagungsband: MikroSystemTechnik
Seiten: 4Sprache: DeutschTyp: PDF
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Autoren:
Strohmeier, O.; Emperle, A.; Focke, M.; Roth, G.; Zengerle, R.; Stetten, F. von (Lehrstuhl für Anwendungsentwicklung, Institut für Mikrosystemtechnik - IMTEK, Universität Freiburg, Deutschland)
Czilwik, G.; Roth, G.; Mark, D.; Zengerle, R.; Stetten, F. von (HSG-IMIT - Institut für Mikro- und Informationstechnik, Villingen-Schwenningen, Deutschland)
Roth, G.; Zengerle, R. (BIOSS Centre for biological signalling studies, Universität Freiburg, Deutschland)
Inhalt:
Vorgestellt wird ein neues Verfahren zur integrierten DNA Aufreinigung mit Hilfe magnetischer Partikel auf einer zentrifugal-mikrofluidischen Foliendisk. Wesentliche Vorteile gegenüber dem Stand der Technik sind kurze Prozesszeiten und Ausbeuten von annähernd 100 % (verglichen mit der manuell durchgeführten Referenzextraktion), automatischer Betrieb bei niedrigen Rotationsfrequenzen (< 8 Hz) und ein modulares Design der mikrofluidischen Kammern. Der Transport der magnetischen Partikel zwischen den einzelnen Kavitäten erfolgt durch ein Zusammenspiel magnetischer und zentrifugaler Kräfte. Mit dem vorgestellten System konnte vollautomatisch DNA in PCR Qualität aus 3 Verdünnungen (1,5 x 104 Kolonie bildende Einheiten (KbE); 1,5 x 106 KbE und 1,5 x 10 8 KbE pro Probe) eines 'Escherichia coli' Lysats in ~ 6 min extrahiert werden.