PCR im kontinuierlichen Fluss: Chips, Gerät und Methoden zur miniaturisierten PCR

Abstract:
Die Polymerase-Kettenreaktion (PCR) ist dient der Vervielfältigung der Erbsubstanz mittels Biokatalysator, dem Enzym Polymerase. Sie ist eine der dominierenden Techniken der Biotechnologie. Mehrere Methoden zu ihrer Miniaturisierung wurden im Lauf der Zeit vorgeschlagen. Ein einzigartiger Ansatz, der sich die Vorteile der Mikrotechnik zunutze macht, ist die PCR im kontinuierlichen Fluss, bei der das konventionelle Temperieren der Probe dadurch ersetzt wird, dass die Probe über stationäre Temperaturzonen hinweg gepumt wird. In diesem Beitrag stellen wir das erste chipbasierte Komplettsystem „ChipGenie“ für die Durchfluss-PCR vor, das aus verschiedenen Kunststoff-Chips, einem Betriebsgerät sowie den notwendigen Protokollen zur Durchführung der PCR besteht. Ein Geschwindigkeitsvorteil um den Faktor 4 gegenüber einem konventionellen System konnte bereits bei den ersten Versuchen experimentell ermittelt werden.